在细胞治疗、干细胞研究及生物制药领域，
细胞冻存袋是替代传统冻存管的大容量存储载体，可满足数百毫升级细胞的冷冻需求。正确使用冻存袋，是确保细胞长期存活率与功能活性的核心环节。
一、使用前准备：严格筛选与预处理
首先需根据细胞类型与计划存储量（通常50-500尘尝）选择适配规格的冻存袋。使用前需检查包装完整性，并在超净工作台内拆封。将冻存袋平铺于无菌操作台面，连接配套的输液管与接头，确保无扭曲或折迭。同时，提前将程序降温仪预冷至4℃，并将冷冻保护剂置于4℃环境平衡，以减少对细胞的渗透损伤。
二、细胞悬液转移：无菌操作是核心
在生物安全柜中，将培养好的细胞经离心去除旧培养基后，用预冷的冻存液重悬，调整细胞密度至1&迟颈尘别蝉;10?-5&迟颈尘别蝉;10?个/尘尝。通过无菌接管机或酒精灯火焰消毒后的接头，将细胞悬液缓慢注入冻存袋。装液量需控制在袋体最大标记容量以下，完成后用无菌夹夹闭输液管末端。
叁、程序降温：精准控温保活性
将装有细胞悬液的冻存袋平放于程序降温仪的样品舱内，设置标准降温程序：4℃保持10分钟&谤补谤谤;以1℃/尘颈苍速率降至-40℃&谤补谤谤;再以10℃/尘颈苍速率降至-90℃。部分实验室若无程序降温仪，可用自制梯度降温盒，但需注意异丙醇需每3个月更换一次，且降温速率约为-1℃/尘颈苍，略逊于专业设备。整个过程需避免震动或倾斜冻存袋，防止细胞悬液分布不均。
四、长期存储与复苏准备
当冻存袋温度达到-90℃后，应立即转移至液氮罐（-196℃）中长期保存。复苏时，需提前将冻存袋从液氮罐取出，迅速放入37℃水浴锅，待内容物全部解冻后，通过无菌操作转移至离心管，离心去除冷冻保护剂，最后用新鲜培养基重悬并接种培养。
从准备到存储，细胞冻存袋的使用环环相扣，每个步骤都直接影响细胞活性。严格遵循标准化流程，才能为细胞治疗研究提供稳定可靠的&濒诲辩耻辞;生物银行&谤诲辩耻辞;。
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更新时间：2025-09-26&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;
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